[00082392]一種酰胺酶PCR的方法
技術詳細介紹
本[發明專利]公開了一種酰胺酶PCR的方法，具體為：在PCR反應管中加入模板DNA 0.4 uL、5*快速高保真PCR緩沖溶液2 uL、20*快速PCR增強劑0.5 uL、引物1 0.3 uL、引物2 0.3 uL、DMSO 0.6 uL、快速高保真聚合酶0.2 uL、水5.7 uL，組成10 uL反應體系，升溫至95℃，保持2min，95℃下DNA變性，保持30s，然后于56℃下退火20 s，最后于72℃下引物延伸，保持2min；循環30次，于72℃下保持10min，最后于12℃保存樣品，進行電泳。本[發明專利]操作簡單，可參考性強，對于快速獲得較佳PCR的條件具有很強的可操作性。此外，對于G?C堿基對含量較高的放線菌的PCR條件的探究也具有較高的參考價值，且經試驗驗證所述酰胺酶PCR的方法能大大提高目標條帶擴增量，提高目標產物的產量。
