本發明提供一種纖維酶輔助的芒果葉中芒果苷和槲皮素的提取方法,將鮮芒果葉預處理后得干燥的芒果葉粉末,備用;稱取干燥的芒果葉粉末,并加入pH為5.1的75%乙醇溶液,加入6mg纖維素酶,于55℃下浸泡酶解70min;浸泡后的提取體系在100W下超聲提取40min,真空抽濾得芒果葉黃酮類物質粗提液;將芒果葉黃酮類物質粗提液過硅膠層析柱分離純化,用不同梯度的洗脫劑進行梯度洗脫,每個梯度使用3倍于柱體積的洗脫液進行洗脫,洗脫速率控制在1mL/min;分段收集得到芒果苷和槲皮素。本發明填補了現有技術中該技術的空白,而且本發明提取方法易于操作、成本低,還具有穩定性好、提取率高的特點,能夠適應于工業化生產。