摘要:發明公開了一種大片段基因整合提高里氏木霉纖維素酶酶活的方法,屬于基因工程領域。本發明通過多次同源重組將黑曲霉維素酶系相關的基因大片段一次性整合到里氏木霉基因組中,具體為將兩段里氏木霉基因組片段、潮霉素抗性基因單元盒整合到黑曲霉基因組上,再以這兩段片段為同源重組位點、潮霉素抗性為篩選標記將黑曲霉基因組上這兩個位點之間的大片段整合到了里氏木霉基因組上,達到纖維素酶基因、非纖維素酶基因多克隆的效果,從而影響里氏木霉的代謝網絡,提高里氏木霉的纖維素酶酶活。通過本發明方法得到的菌株的濾紙酶活是出發菌株的2.28倍。