[00011613]鏈霉菌蘋果酸脫氫酶的開發與利用
技術詳細介紹
蘋果酸(malicacid)又名：2－羥基丁二酸，由于分子中有一個不對稱碳原子，有兩種立體異構體。自然界中，以三種形式存在，即D-蘋果酸、L-蘋果酸和其混合物DL-蘋果酸。
本項目是將幾種鏈霉菌來源的編碼MDH的基因通過經蛋白質工程改造，篩選對工業生產過程具有經濟價值的突變體，然后將改造后的MDH基因克隆到表達載體中，構建重組工程菌株，通過誘導表達MDH蛋白，然后用于拆分DL-蘋果酸，實現高效、經濟、環保的微生物轉化法生產D-蘋果酸和L-蘋果酸。并且優化菌株的發酵條件和產物的分離純化工藝，提高重組菌的拆分能力和產品的純度，以用于工業大規模微生物轉化生產。
應用領域
一、D-蘋果酸：主要應用于手性藥物、手性添加劑、手性助劑等領域，它在制藥行業作為手性合成的手性源，在某些手性化合物的不對稱合成過程中具有不可替代的作用，可用于合成泛酸，β-內酰胺類抗生素，信息素和生物堿等手性藥物。
二、L-蘋果酸：L-蘋果酸(L-malicacid)為左旋體，由于L-蘋果酸屬于發酵生產的產品，安全性能有保障，因此，國際市場上需求量快速增加，近年來需求量保持在年均10％左右的高速度。應用及功能：1、食品行業2、醫藥行業3、日化行業的應用：用于牙膏中作為抗菌斑斑劑和抗牙結石劑，合成香料配方等。4、在化學行業的應用：用作除垢劑、熒光增白劑的合成原料之一。添加到蟲膠清漆或其它清漆中，可防止漆面結皮，用該種酸生產的聚脂樹脂和醇酸樹脂是有特殊用途的塑料。5、保健功能：酸味調節劑、發酵、凝膠作用、抑制酶促褐變、保鮮劑、除腥脫臭劑、面食強化、減鹽作用、保護維生素C、保色作用、抗氧化、抑制油脂酸敗
主要技術指標情況：
1、蘋果酸脫氫酶的最適表達條件
2、蘋果酸脫氫酶的最適催化反應溫度、pH，以及催化反應緩沖液的配置
3、拆分反應的條件（底物濃度、溫度、pH等）
