本發明公開了一種還原響應多糖PEI納米凝膠及其制備方法,所述的還原響應多糖PEI納米凝膠由多糖與PEI靜電作用形成凝膠后再加入二硫交聯劑進行交聯形成,還原響應多糖PEI納米凝膠中各組分的重量份數為:多糖1-100;PEI1-100;二硫交聯劑10-2000。本發明的還原響應多糖PEI納米凝膠具有低毒性的優點,還能很好的包裹基因或蛋白質,保護所包裹的物質不受到溶菌酶的降解,被免疫細胞攝取,進入細胞后對還原性的條件響應,使所包裹物質的釋放速度加快,可作為納米凝膠載體負載蛋白質、多肽或核酸,本發明的納米凝膠還有免疫佐劑的作用,其制備全過程均在水溶液中進行,環保無污染。