本[發明專利]公開了一種水鬼蕉葉斑病致病毒素的提取及活性測定方法,其包括如下步驟:1)取患有葉斑病的水鬼蕉上的患病部位提取出灰霉菌粗毒素和輪枝孢菌粗毒素并鑒定;2)對步驟1)提取出的灰霉菌粗毒素和輪枝孢菌粗毒素進行蛋白質含量測定;3)將步驟1)提取出的灰霉菌粗毒素和輪枝孢菌粗毒素分別配制成不同濃度的溶液,通過涂抹法涂抹健康水鬼蕉幼苗葉片,進行致萎活性測定。本[發明專利]針對水鬼蕉葉斑病毒素的提取及活性測定方法,有效得出了灰霉菌粗毒素和輪枝孢菌粗毒素的蛋白質含量及對水鬼蕉葉斑病的影響,為后期水鬼蕉葉斑病的防治提供技術支持。