[00080419]一種提高EGF91在重組畢赤酵母中表達效率的方法
技術詳細介紹
本[發明專利]提供了一種提高EGF91在重組畢赤酵母中表達效率的方法，其包括如下步驟：(1)擴增EGF91基因、酶切；(2)將酶切產物分離后回收、連接反應；(3)連接反應后轉化至 DH5α感受態細胞，提取陽性轉化子質粒，獲得重組表達載體；(4)轉化畢赤酵母，得到重組菌株；(5)酶切、擴增pfu?sHSP基因，用Nhel和Spel進行雙酶切；(6)分離、回收酶切產物，進行連接反應；(7)轉化至 DH5α感受態細胞，提取陽性轉化子質粒，獲得重組表達載體；(8)將表達載體導入菌株中，獲得重組酵母；(9)接種、培養重組酵母。本[發明專利]的方法能夠提高EGF的表達量。
