本發明屬于生物檢測領域,具體涉及一種同時測定苦玄參藥材中苦玄參苷IA和苦玄參苷IB含量的方法。包括以下步驟:采集苦玄參鮮株,陰涼處晾干制成苦玄參藥材??嘈⑺幉姆鬯?,稱取適量藥粉,用50%~70%濃度甲醇,加熱回流30~40分鐘,中性濾紙初濾,濾液用微孔濾膜過濾,得提取液。提取液以苦玄參苷IA和苦玄參苷IB為對照品,采用Agilent?ZORBAX?SB-C18柱、乙腈-水為流動相,在檢測波長264nm、柱溫35℃、流速1.0ml/min條件下,用高效液相色譜測定其含量。本發明測定方法能同時測定苦玄參藥材中苦玄參苷IA和苦玄參苷IB的含量,具有快速、準確、穩定且重復性好、節約測定成本的特點。