本[發明專利]提供了一種安卡拉病毒實時熒光定量PCR引物對,包括FAdV?4?F和FAdV?4?R。所述引物對可用于制備安卡拉病毒實時熒光定量PCR檢測試劑盒,從而對安卡拉病毒進行病毒含量的檢測。該試劑盒包括陽性對照標準品、PCR反應液和陰性對照;所述陽性對照標準品為含有FAdV?4序列的重組質粒pMD18?FAdV?4;所述PCR反應液包括提取的模板DNA,引物對,SYBR GreenⅠ熒光染料溶液,Taq酶,ddH2O,所述SYBR GreenⅠ熒光染料溶液包括SYBR Green I熒光染料、dNTP、反應緩沖液;雙蒸水作為陰性對照。用本[發明專利]的引物對制備的安卡拉病毒實時熒光定量PCR檢測試劑盒,檢測方法簡便快捷,重復性好,敏感度高,特異性強,可以實現大通量樣品的檢測,可對安卡拉病毒進行快速的、高敏感度的實時熒光定量PCR檢測。