本發明公開了一種HPLC法同時測定八味龍鉆顆粒中橙皮苷、氯化兩面針堿及補骨脂素三種活性成分含量的方法,該方法采用的色譜條件如下:色譜柱Phenomenex Gemini C18 (250mm×4.6mm,5μm);流動相為乙腈:0.1%磷酸水(梯度洗脫);流速為1ml.min?1;檢測波長為286nm和245nm(0~30min:286nm,30~40min:245nm);柱溫30℃。進樣量:5μL。在此色譜條件下,色譜峰分離良好,橙皮苷、氯化兩面針堿及補骨脂素分別在84.68~508.1μg.ml?1、16.84~101.0μg.ml?1、5.504~33.02μg.ml?1濃度范圍內與其峰面積呈良好的線性關系(r分別為0.99053、1.00000、0.99998);平均加樣回收率分別為98.1%、99.9%、100.1%,RSD分別為1.3%、2.7%、2.5%(n=6)。本方法簡單、快速、準確、重現性好,可為全面評價和控制八味龍鉆顆粒的質量提供理論依據。