本發明公開了一種羊絨織物的分子鑒定方法,包括以下步驟:從羊絨織物中提取線粒體DNA(mtDNA);進行cytB基因的PCR擴增;將擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳,觀察結果,如果出現暗條帶,則鑒定含有羊絨成分。羊絨織物包括純羊絨織物和非純羊絨織物,非純羊絨織物包括含有部分量羊絨的織物和不含有羊絨的織物。優選方案中,從羊絨織物中提取線粒體mtDNA采用Biomega試劑盒法。本發明用不同的方法從純羊絨及羊絨織物中提取到mtDNA,利用根據設計出的cytB基因的特異性引物進行PCR(聚合酶鏈式反應)擴增,然后進行瓊脂糖凝膠電泳,可以定性對羊絨分子進行鑒定。