本發明公開了工業微生物發酵領域中一種釀酒酵母發酵生產谷胱甘肽的工藝,該釀酒酵母生產谷胱甘肽發酵工藝為利用改良O?media發酵培養基,發酵16 h時以1.5 g/L/h和0.4 g/L/h恒定速度流加糖蜜和玉米漿,在細胞密度達到一定程度后,向發酵液中添加一定量KMnO4緩釋顆粒和檸檬酸鈉等,發酵120 h時,發酵液中細胞濕重達到121.4 g/L,GSH積累量達到5.78 g/L,本發明通過O?media發酵培養基改良、糖蜜和玉米漿流加,提高發酵液細胞密度;通過氧化刺激物KMnO4緩釋顆粒添加,維持對酵母細胞氧化脅迫同時緩解其對酵母生長的影響;通過能量輔助物質檸檬酸鈉添加,改善胞內ATP水平,最終顯著改善谷胱甘肽積累量,降低生產成本。