[00072932]魚類卵巢生殖細胞染色體的制備方法
技術詳細介紹
本發明公開一種魚類卵巢生殖細胞染色體的制備方法，是取活體成熟卵巢并用生理鹽水清洗；將卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理鹽水中且將卵巢切成小段，置于搖床上室溫避光培養1～3h；在培養皿底部涂一層1％瓊脂并盛入4％冰醋酸溶液，從所培養的卵巢中取出幾粒卵放入4％冰醋酸溶液中，待卵核移動到動物極后將卵核剝離出來，再將卵核周圍的卵黃剝掉，將卵核放入裝有預冷的卡諾固定液中冷凍過夜，所述卡諾固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成，甲醇與冰醋酸的體積比為3∶1；再取出冷凍過夜的3～5粒卵核于載玻片上放置10～20秒；然后再將載有卵核的載玻片放入裝有染色劑的染缸中避光染色30～45min，純水避光浸泡載玻片30min后，將蓋玻片蓋在載玻片上。
