[00072910]菲律賓蛤仔抗菌蛋白的制備方法
技術詳細介紹
本發明公開一種菲律賓蛤仔抗菌蛋白的制備方法，以如SEQ ID NO：1 所示cDNA為模板、以具有EcoR I 和NotⅠ兩個酶切位點的PCR反應引物進行PCR反應；上游引物EcoR I：5'? GAATTCATGGCTTGGCTGACAGCATCTG ?3' 下游引物NotⅠ：5'? GCGGCCGCTTATTTGTCTTTAACAGCTCTC ATTCTGC ?3'；將PCR反應產物與克隆載體相接，并轉化到感受態細胞；提取所得克隆和表達載體質粒，分別用EcoR I和Not I雙酶切，膠回收目的片段后用連接酶連接，再轉化到感受態細胞；提取陽性克隆并將所得陽性克隆進行IPTG誘導表達；對表達的重組蛋白進行提取并純化。
