摘要:本發明公開了一種具有生產和回收纖維素內切酶雙重功能的酵母菌株的構建,屬于酶工程領域。通過把釀酒酵母TDH3啟動子序列、釀酒酵母分泌信號肽編碼序列、煙曲霉纖維素內切酶編碼序列、釀酒酵母凝聚因子C端的400個氨基酸片段編碼序列、釀酒酵母TDH3終止子序列按順序合成,在兩端加上限制性內切酶位點,通過酶切構建到pPIC9K質粒中,再將該質粒轉化到酵母中得到具有生產和回收纖維素內切酶雙重功能的酵母菌株。其生產纖維素內切酶的回收率達到86%,發酵后內切酶的酶活達到8.5U/g濕酵母。本發明實現了纖維素內切酶生產和同步濃縮回收的一步完成,降低了能源消耗,降低了成本,具有較強的實用性。