聯系人: 華南農業大學
所在地: 廣東廣州市
摘要:本發明涉及生物技術領域,具體公開了一種犬源單鏈抗體及其構建方法和應用。本發明通過設計犬抗體可變區簡并引物,成功擴增出犬的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL基因。在此基礎上利用噬菌體展示技術,成功構建犬源單鏈抗體scFv文庫。所構建的scFv單鏈抗體庫具有多樣性和足夠大的庫容量。本發明通過Dot-ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原從scFv單鏈抗體庫中篩選到3株能夠與犬DEA1.1血型抗原相結合的單鏈抗體。其中Clone16具有較強的結合特性。根據Clone16基因構建了pET-32a-Clone16重組蛋白進行原核表達,純化得到的抗體具有結合活性。為制備犬DEA1.1血型鑒定試劑提供了堅實的基礎。