[00051763]一種植物質體表達載體的構建方法及應用
聯系人： 湖北大學
所在地： 湖北武漢市
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技術詳細介紹
摘要：本發明公開了一種植物質體表達載體的構建方法及應用，構建了gfp表達盒和aadA表達盒，把去除多克隆位點的質粒pBluescript II sk(+)載體片段、gfp表達盒、aadA表達盒、與質體基因組同源的左同源片段和右同源片段這5個片段通過無酶克隆技術一步轉入大腸桿菌中，驗證正確的載體命名為pYY12。利用金粉包裹pYY12質粒DNA導入質體基因組中，Southern blot證實目的基因導入質體基因組中，Northern bolt顯示了GFP基因的轉錄水平，激光共聚焦顯微鏡證實了GFP的存在位置，SDS?PAGE法分析了GFP蛋白的高水平的積累量，達到總可溶性蛋白的9％左右。
