聯系人: 華南農業大學
所在地: 廣東廣州市
摘要:本發明公開了一種薇甘菊萎蔫病毒基因診斷試劑盒及檢測方法,該試劑盒包含兩對特異性引物,分別是:MMWV RNA1 F:5’-TGAGGAATTGGGAAGGTC;MMWV RNA1 R:5’-CGACTCGGCGTCATAAAC;MMWV RNA2 F:5’-GGAATCCCTGAAACTATGC;MMWV RNA2 R:5’-TGCTCCACCAATCACAACA。檢測方法包括以下步驟:(1)提取待測植物樣品的RNA;(2)往RNA中分別加入兩種引物,PCR擴增后分別得到兩種cDNA;(3)往兩種cDNA中分別加入兩種引物,PCR擴增得到兩種擴增產物;電泳,若擴增產物1在329bp出現明亮的條帶,同時擴增產物2在364bp出現明亮的條帶,則MMWV為陽性,說明待測植物樣品中攜帶薇甘菊萎蔫病毒。本發明的試劑盒和方法可以特異性地擴增攜帶MMWV病毒的待測樣品的相關基因片段,所建立的PCR反應體系保證檢測結果的快速性、穩定性和準確性。