[00051580]一種基于雜交瘤細胞的單鏈抗體的制備方法
聯系人： 華南農業大學
所在地： 廣東廣州市
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技術詳細介紹
摘要：本發明公開了一種基于雜交瘤細胞的單鏈抗體的制備方法。本發明的制備方法，步驟為：以雜交瘤細胞總mRNA為模板反轉錄得cDNA，選用簡并性低的通用引物擴增全套抗體重鏈可變區和輕鏈可變區基因；將擴增出的重、輕鏈可變區基因序列輸入IMGT數據庫進行分析，排除來源瘤細胞的抗體基因和無義基因，得到候選重鏈和輕鏈可變區基因；將該基因翻譯成氨基酸序列后進行三維結構同源模建，獲得單鏈抗體的三維模擬結構，與相應抗原靶標分子進行分子對接分析；分析結果正確的候選重鏈和輕鏈通過重疊延伸PCR法拼接成單鏈抗體基因，進行表達及抗體活性鑒定。本發明的制備方法適合所有源于單克隆雜交瘤細胞的單鏈抗體制備，過程簡易、快速，產品質量高。
