[00031782]一種殺蟲晶體蛋白的非受體結合蛋白及其提取方法與應用
技術詳細介紹
蘇云金芽胞桿菌（Bacillus thuringiensis，簡稱Bt）制劑是世界上應用最廣的微生物殺蟲劑，其主要活性成分為殺蟲晶體蛋白（Cry蛋白）。Cry蛋白的殺蟲機制是一個復雜的進程，Cry先是被昆蟲中腸蛋白酶作用后激活，之后與中腸BBMV膜表面的受體蛋白如氨肽酶N（APN）、堿性磷酸酶（ALP）和鈣黏蛋白類等結合，形成寡聚體，插入膜內，形成離子孔洞，最終導致害蟲死亡。Cry蛋白與受體的結合，被公認為是其殺蟲過程極其重要的一個關鍵步驟。雖然Cry蛋白已經廣泛應用于防治害蟲，但是目前超過60%的害蟲對轉基因作物產生了抗性。此外，仍然有許多重要的害蟲因現有的Cry蛋白對其活性不高而無法得到防治。針對Cry應用中存在著的這兩個重要問題，全球科學家們研究了多種對付手段，包括更換cry基因、分離新型cry基因、對Cry蛋白實施改造使其與受體蛋白更好地發生結合以提高其殺蟲活性等。但是，研究者忽略了害蟲中腸中可能存在著能結合Cry蛋白的非受體分子進而影響了Cry的殺蟲活性。本發明公開了一種殺蟲晶體蛋白的非受體結合蛋白及其提取方法和應用，該非受體結合蛋白包括但不局限于微管蛋白、谷胱甘肽合成酶、ATP合成酶、精氨酸激酶、凝集素、胰蛋白酶、翻譯延伸因子和細胞色素C氧化酶，且該非受體結合蛋白是通過親和層析自包含中腸腸腔液的害蟲中腸的水溶性物質中提取的，上述親和層析所用的親和分子為殺蟲晶體蛋白Cry。應用本發明的非受體結合蛋白可在不改變工廠現有產品基礎上，提高Cry的殺蟲活性，克服害蟲對現有產品所產生的抗性問題，以及一些重要害蟲對現有產品活性不高的問題。
