[00010303]一種大腸桿菌胞外生產外源蛋白的集成化方法
技術詳細介紹
一種大腸桿菌胞外生產外源蛋白的集成化方法
本發明公開了一種大腸桿菌胞外生產外源蛋白的集成化方法，包括單基因突變的分泌型大腸桿菌的菌株構建、外源蛋白表達的分泌型重組大腸桿菌的菌株構建及分泌型重組大腸桿菌的目標蛋白表達過程。本發明采用大腸桿菌的pal或mrcB等基因突變株為宿主和定位于周質空間的重組蛋白質粒，使得重組蛋白的發酵和胞外分泌同時進行。從而實現降低目標蛋白的胞內降解，提高重組蛋白表達；同時減少重組蛋白的胞內過度積累，而降低包涵體形成；消除細胞破壁工藝，減少熱原污染，方便分離純化；進而達到降低生產成本，提高產品表達及質量的目的。經檢測，超過40%的重組蛋白滲漏到培養基中，表達水平為10~30%。
